丁酸梭菌的功效验证

丁酸梭菌，又名酪酸菌，是一种专性厌氧的革兰氏阳性芽孢杆菌。丁酸梭菌代谢产物的突出特点就是丁酸、B族维生素以及叶酸含量高。大量研究表明，丁酸梭菌具有极强的整肠作用，它能够通过抑制致病菌的生长繁殖从而调节肠道的微生态平衡，预防和治疗腹泻、肠炎等疾病。

1、实验材料：共培养用液体培养基;LB培养基

2、实验方法：A、丁酸梭菌对霍乱沙门氏菌的抑制作用

a、霍乱沙门氏菌种子培养：

取平板活化好的菌转接到LB液体三角瓶中

，装液量25mL/mL，37℃，r/min

培养12-24h,取培养菌液测活菌数和pH值。b、酪酸菌单独培养：

取酪酸菌菌粉0.1g接种到装量为25mL/30

mL的细菌培养瓶中,置于37℃静止恒温培

养24h左右。(可按此比例扩大培养体积，

最低比例为0.1g：25mL)c、丁酸梭菌和霍乱沙门氏菌混合培养：

活化好的酪酸菌培养液5mL接种到装液量

为20mL/30mL的细菌培养瓶中，再把培

养好的霍乱沙门氏菌菌液1mL同时接入该

共培养液中，37℃恒温静止培养。对照组

为向同样的共培养液体培养基中(装液量

为20mL/30mL)接种霍乱沙门氏菌菌液1

mL，37℃恒温静止培养。分别在16和24

h测pH值及沙门氏菌活菌数。d、计数采用平板涂布法。

选择2—3个适宜梯度稀释液，吸取μL

涂布平板，倒置于严格厌氧培养箱或严格

厌氧培养袋中，37℃培养18—36h后计数。

每个梯度做两个平行，每个平板的菌落数

在30—范围内有效。

B、丁酸梭菌对肠出血性大肠杆菌、魏氏梭菌

的抑制作用实验方法同上，魏氏梭菌种子

液为严格厌氧，应采用共培养液体培养基。

3、实验结果A、对霍乱沙门氏菌的抑制结果

　丁酸梭菌对霍乱沙门氏菌表现出非常强

的抑制作用，24h活菌数从单独培养时2.0

×CFU·mL-1减少到1.2×CFU·mL-1。

B、对肠出血性大肠杆菌的抑制结果

　混合培养16h，肠出血性大肠杆菌活菌

数从单独培养时3.5×CFU·mL-1减少到

7×CFU·mL-1，24h活菌数减少到0.4

×CFU·mL-1，pH从6.8下降至4.6，呈

现良好抑制作用。

C、对魏氏梭菌的抑制作用

　混合培养后，魏氏梭菌活菌数从单独培

养时的1×CFU·mL-1减少到1×C

FU·mL-1，pH值从6.8下降到4.5，表现出

良好的抑制作用。

4、小结

A、丁酸梭菌为严格厌氧菌，产氢气。液体培

养基中加入厌氧指示剂，粉红色表明培养

基上层有氧；培养一段时候后液体表面有

气泡，为正常现象。B、丁酸梭菌平板形态如下。C、丁酸梭菌对霍乱沙门氏菌、肠出血性大肠

杆菌和魏氏梭菌均有显著的抑制作用，可

将肠出血性大肠杆菌和魏氏梭菌细菌含量

控制在发病浓度之下，防止发病。尤其是

对霍乱沙门氏菌抑制作用更强，可以达到

净化霍乱沙门氏菌的作用。

　　丁酸梭菌在体内的定植产生大量的

丁酸、乙酸、乳酸等短链脂肪酸，以及B

族维生素、叶酸和一些消化酶类,促进肠

道内有益菌群如双歧杆菌等乳酸菌的增殖

,抑制魏氏梭菌、肠出血性大肠杆菌、沙

门氏菌等致病菌的繁殖，减少氨、胺、吲

哚等肠道毒素的产生及对肠粘膜的毒害，

使肠道内水分潴留明显减少，进而避免了

其所导致各种肠道疾病的发生(坏死性肠

炎、结肠炎、回肠炎等)，恢复肠免疫功

能和正常的生理功能，达到无病防病、有

病治病的作用。

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